Gourt Home::Gourt :: Colorazione di Gram
La colorazione di Gram è un esame di laboratorio che dà ragione della classificazione dei batteri in gram-positivi e gram-negativi (gram+ e gram-). Fu messo a punto nel 1884 dal medico danese Hans Joachim Christian Gram, e mette in evidenza alcune proprietà fondamentali della membrana esterna dei microrganismi.
Con tale metodo è possibile esaminare sia batteri in coltura che frammenti di tessuti.
Procedura
L'esame si basa sulla colorazione delle cellule in coltura con un colorante basico (per esempio violetto di genziana ) e lavaggio con liquido di Lugol. Successivamente il materiale organico viene trattato con una soluzione decolorante (alcool etilico o simili). A questo punto i batteri gram+ hanno trattenuto il colorante basico, mentre i gram- sono grigiastri, privi di colorazione. Per far risaltare meglio la differenza si colora quindi il materiale con un colorante di contrasto, in genere safranina o fucsina. Dopo questo passo finale, i batteri gram+ hanno colore violetto, mentre i gram- hanno color giallo, rosso o arancio.
Le colture batteriche molto vecchie tendono a trattenere meno il colorante, apparendo meno gram-positive di quanto siano in realtà; alcune (poche) specie di batteri inoltre non danno un responso chiaro alla colorazione, e sono dette gram-variabili.
La colorazione di Gram è una colorazione di tipo regressivo in quanto dopo una prima colorazione generale con violetto di nicole o di genziana, avverrà una decolorazione dei batteri gram- con dell' alcool etilico puro, per poi essere ricolorati utilizzando della safranina.
Significato biologico della colorazione
La differenza nella capacità di trattenere il colorante basico è data dalla quantità di peptidoglicano (mureina) contenuto nella parete cellulare: i batteri gram-positivi hanno pareti cellulari relativamente semplici, che contengono dal 40% al 90% di mureina: invece i batteri gram-negativi hanno pareti più complesse, di cui la mureina costituisce solo il 5-10% e in cui predominano proteine, fosfolipidi e lipopolisaccaridi. Grazie alle loro pareti complesse, i batteri gram-negativi sono più resistenti agli antibiotici, ai disinfettanti e ai farmaci in generale.
Colorazione di gram di alcuni microrganismi comuni
| Famiglia | Gram | Aspetto | Informazioni | Rappresentanti |
|---|---|---|---|---|
| Micrococchi | + | cocchi a grappoli, ammassi | nelle salamoie, utili per la stagionatura degli alimenti | |
| Stafilococchi | + | cocchi a grappoli, cubi | patogeni nel latte e derivati. Producono tossine. | Staphylococcus aureus |
| Bacilli | + | bastoncelli | provocano alterazioni in molti alimenti. Responsabili del carbonchio. | |
| Clostridium | + | bastoncelli | provocano putrefazione e producono tossine negli scatolami | Clostridium tetani, Clostridium botulinum |
| Batteri propionici (corynebacteriaceae) | + | bastoncelli | danno le occhiature a formaggi come l'emmenthal o il grana | |
| Micobatteri | + | bastoncelli | possono provocare o aggravare la tubercolosi | |
| Brucella | - | bastoncelli | sulla pelle e nelle mucose | |
| Coliformi | - | bastoncelli | possono provocare salmonellosi | Escherichia coli |
| Pseudomonas | - | bastoncelli | patogeni, nell'acqua e nel suolo | |
| Aeromonas | - | bastoncelli | patogeni, nell'acqua e nel suolo |
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