Coloration de Gram

La coloration de Gram doit son nom au bactériologiste danois Hans Christian Gram. C'est une coloration qui permet de mettre en évidence les propriétés de la paroi bactérienne, et d'utiliser ces propriétés pour les distinguer et les classifier.

Voici succinctement les différentes étapes de cette coloration :

Coloration par le violet de gentiane ou cristal violet ;
Mordançage au lugol (Solution d'iode iodo-iodurée) ;
Décoloration (rapide) à l'alcool (+acétone) ;
Recoloration à la safranine ou à la fuschine.

Les étapes 1 et 2 colorent en violet le contenu de la bactérie.

L'étape 3 (alcool) décolore par dissolution les bactéries dont la paroi est riche en lipides. Les bactéries dont la paroi est pauvre en lipides conservent leur teinte violette foncée.

L'étape 4 est une contre-coloration ayant pour but de redonner aux bactéries précédemment décolorées une teinte rose permettant de les visualiser au microscope.

À l'issue de cette coloration, certaines bactéries apparaîtront en violet foncé et seront dites à « Gram positives », leur paroi s'est opposée (du fait de son épaisseur) au passage de l'alcool et ont donc conservé leur coloration violette ; d'autres apparaîtront en rose pâle et seront dites à « Gram négatives » leur paroi, plus fine et plus riche en lipides (phospholipides, LPS) laisse l'éthanol (molécule lipophile) pénétrer dans les cellules.

Ces différences de coloration et les différences de formes (bacille ou cocci) sont à l'origine de la classification des bactéries.

Nota: Certains germes restent insensibles à cette coloration, c'est le cas, entre autre, des mycobactéries (famille à laquelle appartiennent les agents de la tuberculose et de la lèpre)

Voir aussi

Bactériologie | Technique de laboratoire | Coloration histologique

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