Gourt Home::Gourt :: Elektroforéza
Elektroforéza je separační metoda, při níž se dělí nabité molekuly (ionty) na principu rozdílných elektroforetických mobilit. Podle prostředí, ve kterém k separaci dochazí dále rozlišujeme:
- Kapilární zónová elektroforéza (též CZE z angl. Capillary Zone Electrophoresis) je druh elektroforézy, při níž jsou nabité molekuly unášeny elektroosmotickým tokem separačního pufru uvnitř kapiláry až k detektoru. Protože tyto ionty migrují v pufru rozdílnými elektroforetickými rychlostmi, dochází k separaci. Během jediného experimentu lze dělit a detekovat jak kladně, tak záporně nabité molekuly (ionty).
- Kapilární gelová elektroforéza ( též CGE z angl. Capillary Gel Electrophoresis) je druh elektroforézy, při níž se v kapiláře nachází gel, jenž maximalizuje diference mezi elektroforetickými rychlostmi velkých iontů různých tvarů, které různě úspěšně migrují póry gelu. Gel zabraňuje vzniku elektroosmotického toku, a proto jen jeden druh kladných či záporných iontů putuje směrem k detektoru. Na rozdíl od CZE při CGE může být separován a detekován během jednoho experimentu pouze jeden typ iontů. Kapilární gelová elektroforéza se využívá zejména pro velké ionty, jakými jsou sacharidy, peptidy, bílkoviny, sestřihy DNA a RNA.
Rychlost
Rychlost elektroforézy lze vyjádřit následujícím vztahem:
- υ = C.E.ζ.εr.ε0/η
kde
- υ je lineární rychlost pohybu částice,
- C je parametr závisející na tvaru částic a tloušťce elektrické dvojvrstvy
- E je intenzita elektrického pole
- ζ je elektrokinetický potenciál
- εr je relativní permitivita kapaliny
- ε0 je permitivita vakua
- η je viskozita prostředí
Historie
V roce 1892 bylo publikováno, že anorganické částice v koloidním roztoku pod vlivem elektrického pole nenáhodně putují. Nedlouho poté byl tento jev popsán i u proteinů ve vodných roztocích.
V roce 1948 byl Nobelovou cenou oceněn Arne Tiselius (švédský chemik), který ve 30. letech minulého století postavil aparaturu separující proteiny krevního séra na základě jejich elektroforetických mobilit.
Externí odkazy
"Elektroforéza"